Достижения науки и техники АПК

Теоретический и научно-практический журнал

2013_12_20_ru

РАЗРАБОТКА ПЦР – ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ И ГЕНОТИПИРОВАНИЯ БАКТЕРИЙ СЕМЕЙСТВА PASTEURELLACEAE

 

А.Г. ГЛОТОВ, доктор ветеринарных наук, зав. отделом
А.В. НЕФЕДЧЕНКО, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник
Т.И. ГЛОТОВА, доктор биологических наук, зав. лабораторией
Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии

E-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Резюме. Среди крупного рогатого скота на молочных комплексах в Сибири преобладающий генотип бактерии Pasteurella multocida – генотип А. При разработке противоэпизоотических мероприятий важно учитывать наличие циркуляции различных генотипов бактерии. Исследования проводили с целью разработки тест-системы для выявления и генотипирования бактерий на основе полимеразной цепной реакции. Для детекции генетического материала бактерий Pasteurella multocida пяти серогрупп и Mannheimia haemolytica рассчитали и синтезировали специфические олигонуклеотидные праймеры, выбранные на консервативные последовательности геномов бактерий в базе данных NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/), позволяющие отличать их от близкородственных видов и серогрупп. В работе использовали три референтных штамма Pasteurella multocida №№ 1231, 681 и Т80, пробы биоматериала от больных животных, а также культуры бактерий, выделенные в ходе диагностических исследований. Аналитическая чувствительность полимеразной цепной реакции для Pasteurella multocida всех серогрупп составила 104 КОЕ/мл, а для Mannheimia haemolytica – 103 КОЕ/мл. Полимеразная цепная реакция эффективна на всех стадиях бактериологических исследований. С ее помощью можно дифференцировать выделенные культуры Pasteurella multocida на генотипы, а также проводить различия между Pasteurella multocida и Mannheimia haemolytica.

Ключевые слова: крупный рогатый скот, респираторные болезни, пастереллез, полимеразная цепная реакция, Pasteurella multocida, Mannheimia haemolytica, генотипы.