Е. В. КОРНИЕНКО1, научный сотрудник (е-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.)
М. А. ИКОНОПИСЦЕВА2, магистрант
Г. П. МАЛЕНКО1, доктор биологических наук, зав. отделом
1Центр экспериментальной эмбриологии и репродуктивных биотехнологий, ул. Костякова, 12, стр. 4, Москва, 127422, Российская Федерация
2Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова, Ленинские горы, 1, стр. 12, Москва, 119991, Российская Федерация
Резюме. Цель работы – повышение эффективности метода витрификации в триацетатцеллюлозных полых волокнах при криоконсервации дозревших in vitro ооцитов крупного рогатого скота (КРС). Эксперименты проводили в 2017–2018 гг. При витрификации/отогревании ооцитов использовали базовую среду TLP-HEPES c 20 % фетальной сыворотки крови КРС, приготовленную с добавлением (TH20) или без добавления (TH20–) солей кальция. В качестве проникающего криопротектора вместе с базовой средой TH20– использовали только этиленгликоль, а с базовой средой TH20 – этиленгликоль и диметилсульфоксид. Дозревшие in vitro ооциты КРС после групповой витрификации в полых волокнах демонстрировали высокий уровень выживания (80,3±1,5 и 79,0±8,5 %) и оплодотворения (83,9±7,9 и 84,4±18,1 % соответственно). В группе TH20– бластоцисты были получены только в 50 % повторов (всего 6 повторов, 140 ооцитов), в группе TH20 в 66,7 % повторов (всего 3 повтора, 65 ооцитов). На 7-е и 10-е сутки культивирования в группе TH20– выход эмбрионов на стадии бластоцисты составил 1,9±3,2 (1 из 51 эмбрионов) и 5,9±0,6 % (3 из 51) соответственно; в группе TH20 – 3,1±4,4 (1 из 48 эмбрионов) и 7,8±6,6 % (3 из 48) соответственно, что сопоставимо с развитием эмбрионов после витрификации дозревших in vitro ооцитов КРС с использованием носителей открытого типа. Выход бластоцист из блестящей оболочки наблюдали только в группе TH20– (3 из 3), что указывает на возможность дальнейшей модификации протокола витрификации ооцитов КРС в полых волокнах путем снижения влияния ионов Ca2+ во время обработки в растворах витрификации/отогревания. Успешное применение методики групповой витрификации в триацетатцеллюлозных полых волокнах дозревших in vitro ооцитов КРС было продемонстрировано впервые.
Ключевые слова: ооцит, витрификация, крупный рогатый скот, триацетатцеллюлозные полые волокна.
Для цитирования: Корниенко Е. В., Иконописцева М. А., Маленко Г. П. Витрификация дозревших in vitro ооцитов крупного рогатого скота в триацетатцеллюлозных полых волокнах // Достижения науки и техники АПК. 2018. Т. 32. № 9. С. 84–88. DOI: 10.24411/0235-2451-2018-10920.