Достижения науки и техники АПК

Теоретический и научно-практический журнал

2016_08_09_ru

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ SSR-МАРКЕРОВ ДЛЯ ОЦЕНКИ УРОВНЯ ГИБРИДНОСТИ СЕМЯН СЛАДКОГО ПЕРЦА

 

Е.В. ДУБИНА, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник (e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.)
С.В. КОРОЛЁВА, кандидат сельскохозяйственных наук, зав. отделом
С.В. ГАРКУША, доктор сельскохозяйственных наук, директор
Всероссийский научно-исследовательский институт риса, пос. Белозерный, 3, Краснодар, 350921, Российская Федерация

Резюме. На базе лаборатории биотехнологии и молекулярной биологии ФГБНУ ВНИИ риса (Краснодар) в 2013-2016 гг. выполнены исследования по разработке методики оценки генетической чистоты семян F1 Capsicum annuum L., основанной на полиморфизме микросателлитных ДНК-маркеров. Материалом послужили генотипы перца сладкого, использованные в селекционной работе в отделе овощекартофолеводста ФГБНУ ВНИИ риса (Краснодар) для создания гибридов F1 Фишт и Памир. Апробировано 12 кодоминантных микросателлитных (SSR) маркеров и установлен уровень их полиморфного информационного содержания для 17 генотипов перца сладкого. Для выделения ДНК из образцов растений использовали бесхлорофилльные семидневные проростки. Экстракцию ДНК выполняли СТАВ-методом. Олигонуклеотидные последовательности кодоминантных SSR-маркеров взяты из базы данных на сайте www.VegMarks. Для электрофоретического разделения продуктов ПЦР использовали 8%-ный полиакриламидный гель на основе 1×Трис-боратного буфера. Визуализацию проводили в ультрафиолете после окрашивания гелей бромистым этидием (EtBr). По результатам ДНК-анализа выделено 3 кодоминантных микросателлитных локуса ДНК (CAMS-117 – 11 хромосома, CAMS-142 – 1 хромосома и CAMS-405 – 8 хромосома) с уровнем полиморфизма, пригодным для молекулярно-генетической дифференциации изученной группы генотипов Capsicum annuum L. (15-16 аллелей). Уровень гибридности F1 Памир по локусам CAMS-142 и CAMS-117 составил 92% (на 100 проанализированных растений – 8 материнских), Фишт – 96%. Установленная высокая степень полиморфизма системы молекулярного маркирования на основе микросателлитных локусов ДНК дает возможность использовать её как надежный лабораторный метод определения уровня гибридности гибридов F1 перца сладкого, а также для оценки сортовых качеств семян.

Ключевые слова: сладкий перец, SSR-маркеры, молекулярное маркирование.

Для цитирования: Дубина Е.В., Королёва С.В., Гаркуша С.В. Использование SSR-маркеров для оценки уровня гибридности семян сладкого перца // Достижения науки и техники АПК. 2016. Т. 30. № 8. С. 42-44.