И. А. ШИЛОВ1, Н. С. ВЕЛИШАЕВА1, Ю. В. АНИСКИНА1, О. С. КОЛОБОВА1, Т. В. ШАЛАЕВА1, О. М. БОРИСЕНКО2, Я. Н. ДЕМУРИН2, С. С. ФРОЛОВ2 1Всероссийский институт сельскохозяйственной биотехнологии, ул. Тимирязевская, 42, Москва, 127550, Российская Федерация
2Федеральный научный центр Всероссийский научно-исследовательский институт масличных культур им. В. С. Пустовойта, ул. Филатова, 17, Краснодар, 350038, Российская Федерация
Резюме. На основе 7 микросателлитных локусов (ORS815, ORS394, HA140, HA432, ORS546, ORS1144, ORS78) создана мультиплексная система генетической идентификации линий и гибридов подсолнечника Helianthus annuus L. Предлагаемая методика позволяет проводить полимеразную цепную реакцию (ПЦР) по всем локусам в одной пробирке с последующим электрофоретическим анализом фрагментов ДНК на генетическом анализаторе. На основании детального экспериментального исследования первичной структуры каждого локуса праймеры для амплификации спланированы так, что анализируемые фрагменты ДНК содержат только области тандемных повторов. К преимуществам предлагаемого подхода следует отнести возможность стандартизации и автоматизации анализа в формате 96-луночного планшета, что открывает возможность для проведения массовых анализов. Система апробирована на 9 гибридах (Амели, Арис, Арнеб, Клип, Сурус, Тайзар, Тайфун, Факел, Фактор), а также родительских линиях, участвовавших в их создании. Данные по размерам фрагментов ДНК по всем локусам оказались одинаковыми для всех индивидуальных растений в пределах линии, что подтверждает их однородность. Совокупные комбинации значений аллельных состояний позволяют различать линии между собой. Все исследованные гибриды также продемонстрировали высокий уровень чистоты. Анализ цифровых ДНК-профилей гибридов показал присутствие в каждом из них соответствующих материнских и отцовских аллелей, что подтверждает происхождение гибридов от заявленных родительских форм. Предложенная методика лабораторного сопровождения селекции и семеноводства подсолнечника позволяет в короткие сроки провести генетическую идентификацию линий или гибридов, оценить их однородность, а также качество проведенной гибридизации.
Ключевые слова: подсолнечник (Helianthus annuus L.), ДНК-профиль, микросателлитные локусы.
Сведения об авторах: И. А. Шилов, доктор биологических наук, зав. лабораторией (е-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.); Н. С. Велишаева, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник; Ю. В. Анискина, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник; О. С. Колобова, старший научный сотрудник; Т. В. Шалаева, научный сотрудник; О. М. Борисенко, кандидат биологических наук, зав. лабораторией; Я. Н. Демурин, доктор биологических наук, зав. отделом; С. С. Фролов, кандидат сельскохозяйственных наук, зам. директора.
Для цитирования: Генетическая идентификация линий и гибридов подсолнечника Helianthus annuus L. на основе мультиплексного микросателлитного анализа / И. А. Шилов, Н. С. Велишаева, Ю. В. Анискина и др. // Достижения науки и техники АПК. 2023. Т. 37. №1. С. 10–15. doi: 10.53859/02352451_2023_37_1_10.